产品货号：
MT3325
中文名称：
Bst4.0 DNA/RNA聚合酶(无甘油)
英文名称：
Bst4.0 DNA/RNA Polymerase, glycerol-free
产品规格：
16kU
发货周期：
1～3天
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本制品为Bst3.0和耐热反转录酶的混合酶，Bst4.0 DNA/RNA聚合酶适合于RNA的RT-LAMP反应。与Bst3.0 DNA/RNA聚合酶相比，其反转录活性提高了近100倍，可以检测低灵敏度的RNA分子，是以RNA为模板的LAMP实验的推荐用酶此外，该酶同样可以进行DNA模板的LAMP扩增。
| 组分 | 规格 |
| Bst4.0 DNA/RNA聚合酶(无甘油，32U/μL) | 500μL |
| 10×Bst Buffer(Mg2+-free) | 20mL |
| 100mM Mg2+ | 20mL |
保存：-20℃，有效期3年。
1μL的Bst4.0 DNA/RNA聚合酶(8U/μL)中包含32U的Bst 3.0和80U的耐热反转录酶。
- 本酶制品中不含有甘油，可用于建立冻干体系。
- Mg2+的使用浓度为4～10mM浓度，本制品提供的Bst Buffer中不含Mg2+，通常情况下，在6～8mM Mg2+条件下可获得较好的LAMP结果。
- 有文献报道加入Tte Uvrd解旋酶可改善LAMP的效果。
- 使用无模板DNA作为对照检测扩增的特异性。
- 按下表加入各成分配制LAMP反应液
成分 用量 Bst4.0 DNA/RNA聚合酶(32U/μL) 0.05～0.25μL 10×Bst Buffer(Mg2+-free) 2.5μL 100mM Mg2+ X μL dNTP Mixture (10mM each) 3.5μL 模板DNA/RNA 10ng～1μg 10×Primers 2.5μL ddH2O 至25μL - 10×Primers：16μM FIP/BIP，2μM F3/B3，4～8μM LpF/B each。
- 65℃孵育30～60分钟。
- 85℃加热5分钟热失活Bst4.0 DNA/RNA聚合酶。
图1.RNA模板的扩增，分别用Bst2.0、Bst3.0、Bst4.0以A549细胞RNA为模板，进行RT-LAMP扩增。
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